UC知道哪位高人能帮我翻译一下这段英文生物文献 题目（Interaction between two murein (peptidoglycan)）
来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/05/16 23:46:19
Affinity chromatography with immobilized His-PBP3
A membrane fraction of wild-type E. coli MC1061 was applied to sepharose with immobilized His-PBP3 and to a control sepharose. After washing, the retained proteins were eluted by successively applying two buffers with higher concentrations of sodium chloride.The fractions were analysed for the presence of PBP1B by SDSPAGE, Western blotting and immunodetection .
PBP1B, which is present in different isoforms in the extract,bound specifically to His-PBP3-sepharose and could be eluted with 1 M sodium chloride. The samples were also analysed by SDS-PAGE followed by silver staining. Most proteins present in the membrane fraction had no affinity to immobilized His-PBP3. Several unidentified proteins bound specifically to His-PBP3 and eluted with buffer containing 1 M sodium chloride. Because PBP1B might bind to the immobilized His-PBP3 via other proteins present in the extract, we used the purified proteins to test for d
结果
Affinity色谱法与固定了他PBP3
A狂放类型大肠埃希氏菌MC1061的膜分数被应用了于琼脂糖与固定了他PBP3和对控制琼脂糖。 在洗涤以后，保留的蛋白质通过连续应用与氯化钠的更高的浓度的二缓冲洗脱。分数对于PBP1B出现分析被SDSPAGE，西部弄脏和immunodetection。
PBP1B，是存在用在萃取物的不同的isoforms，具体区域对他PBP3琼脂糖，并且可能洗脱与1 M氯化钠。 银色弄脏跟随的SDS-PAGE也分析样品。 多数蛋白质当前在膜分数没有亲合力固定了他PBP3。 几未认出的蛋白质明确地一定对他PBP3和洗脱与包含1 M氯化钠的缓冲。 由于PBP1B也许束缚到被固定的他PBP3通过其他蛋白质当前在萃取物，我们使用被净化的蛋白质测试对于直接protein–protein互作用由表面胞质基因共鸣。
Surface胞质基因共鸣研究与固定了他PBP3
His-PBP3被结合了对芯片表面通过它的活跃站点。在同一块芯片的Acontrol车道相似地被对待了，但是没有包含固定了他PBP3。 我们从牛奶的choseβ-lactoglobulin A作为捆绑的控制蛋白质固定他的PBP3.Although两蛋白质有在充电对面在连续缓冲的酸碱度，那里是b乳球蛋白质A没有捆绑对他的PBP3表面，即使注射以1 mM的非常高浓度。 PBP1B的Upon应用，有捆绑的一个具体信号对他的PBP3表面和不对控制面。 注射PBP1B的一系列的不同的集中取决于约束常数对他的PBP3表面的在包含10 mM镁氯化物， 150 mM氯化钠和0.05%氚核X-100的Hepe缓冲。 与新近地固定的七个独立实验他的PBP3表面执行了，并且协会和离解曲线分析了与BIAcore软件。 His-PBP3–PBP1B互作用的Scatchard剧情显露了biphas在所有的情况下排行，造成二有些不同的K D价值。 以PBP1B的更低的集中，互作用的K D价值与他PBP3被确定了作为9.56 ± 3.13 × 10-8M， whereass以PBP1B的更高的浓度， K D价值是4.35 ± 0.21 × 10 -7M。
We也设法学习PBP1B之间的互作用和他PBP3相反设置，即捆绑他的PBP3被固