做PCR为什么用taq酶能扩出目的片段而用pfu时却扩不出来？

来源：百度知道编辑：UC知道时间：2024/06/18 23:13:35

做预PCR时，用taq酶扩就能扩出目的片段，但是当用pfu酶扩的时候却扩不出来？！这是什么原因？程序除了延伸温度和延伸时间修改适合pfu酶外，其他都没变。但是就是扩不出来！有哪位老师知道啊~T-T

pfu的保真性比较高，如果你的目的片断比较长，保真性高的酶会造成延伸失败，保真性较低的酶能以单碱基错配为代价继续延伸。

另外，建议检查保质期之类的小问题。

Definitely the quality of your pfu is ...

是不是你扩的片段太长了啊