糖类、蛋白质、脂质的鉴别 细节和注意事项

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/09/21 18:18:12

糖类通常是指葡萄糖,一般用斐林试剂(NaOH和CuSO4的浓度为0.1g/ml和0.05g/ml)检测 会有专红色沉淀产生
注意事项:现配现用
蛋白质用双缩脲试剂,会有紫色的络合物产生
注意事项:现配现用
脂质用苏丹三或苏丹四,在显微镜下观察,红色和橙红色物质是脂质
注意事项:被观察对象切片要薄

检测还原糖时注意事项:①所取材料要白色或近白色。②斐林试剂使用时氢氧化钠和硫酸铜溶液要先混合再用,现配先用。③加热时要注意水浴加热。
检测蛋白质时注意事项:①双缩脲试剂使用时要先加氢氧化钠溶液,再滴加硫酸铜溶液。②硫酸铜溶液不能过量,一般四滴,不然会和氢氧化钠反应生成氢氧化铜,影响颜色的观察。
检测脂肪时注意事项:①花生子叶切片一定要切的很薄。②染色后要洗去浮色,不然多余的染液会影响观察。

碘液+淀粉→蓝色
双缩脲试剂+蛋白质→紫色
苏丹|||染液+脂肪→橙黄色
斐林+还原性糖→砖红色(沉淀)
DNA+二苯铵→蓝色

糖类(还原糖):鉴别时要选用新制的菲林试剂,选用2毫升的要鉴别物质,滴加几滴菲林试剂,隔水加热(注意:加热时不要对着人体),稍后会呈现砖红色沉淀。
蛋白质:鉴别时用双缩脲试剂(与菲林试剂的配置大致相同)加鉴别物质后,滴加几滴双缩脲试剂,稍后鉴别物质呈现棕褐色。
脂质:向鉴别物质上滴加苏丹|||染液,过后用清水洗净,在显微镜下观察(注意:先在低倍镜下观察,有像后,再调到高倍镜,不清楚时调细准焦螺旋,直到清楚为止)观察到的脂质颗粒是橘黄色的。

糖类中的还原糖(葡萄糖、果糖)能与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀;
脂肪 可以被苏丹Ⅳ染成橘黄色 ;蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应 。在还原糖的检测中,斐林试剂甲液和乙液应等量混合均匀后再使用 ,并且要水裕加热;在蛋白质的检测中,在组织样液中应先加入双缩脲试剂A液1ml,再加入双缩脲试剂B液 4滴,不需加热。