那个大哥大姐帮我翻译下

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/15 18:06:28
2.3. Molecular identification of yeasts
Yeast colonies were assigned to the species level by
amplification and restriction of rRNA gene region
(Esteve-Zarzoso et al., 1999). For PCR the primers
ITS1 (50-CCGTAGGTGAACCTGCGG-30) and ITS4
(50-TCCTCCGCTTATTGATATGC-30) were used to
amplify two variable regions on the 5.8S rDNA gene
(White et al., 1990).
Cells were collected from agar slant with a sterile
toothpick and resuspended in 70 ml of PCR mixture
containing 50 mM ITS1, 50 mM ITS4, 0.25mM dNTPs
(Bioline Ltd, London, UK), 1X NH4
+, 2.5mM MgCl2 and
1.2U Taq polimerasa BiotaqTM (Bioline Ltd, London,
UK). The rRNA gene region was amplified in a thermocycler
Gene Amps PCR System 9700 (Perkin–Elmer,
Wellesley, MA, USA) under the following conditions:
initial denaturing at 94 1C for 5 min; 35 cycles of the
denaturing at 94 1C for 1 min, annealing at 55 1C for 1 min,
and extension at 72 1C for 2 min;

2.3.酵母的分子鉴定
酵母殖民地被分配到物种水平通过
rRNA基因地区的扩大和限制
(Esteve-Zarzoso et al.,1999)。 入门PCR
ITS1(50-CCGTAGGTGAACCTGCGG-30)和ITS4
(50-TCCTCCGCTTATTGATATGC-30)习惯于
在5.8种S rDNA基因上放大两个易变的地区
(白色的et al.,1990)。
细胞收集从那里琼脂倾斜有一不结果
在PCR 混合物的70 ml的牙签和resuspended
包含50里ITS1,50里ITS4,0.25里dNTPs
(Bioline英国,伦敦,有限公司),1X NH4
+,2.5里MgCl2 和
1.2U Taq polimerasa BiotaqTM(Bioline有限公司,伦敦,
英国)。 rRNA基因地区被在thermocycler里放大
基因安培PCR 9700系统(珀金-埃尔默,
在下列条件下韦尔斯利,MA,美国):
5分的在94 1 C 最初变性; 35 循环
1分在94 1 C变性1分,在55 1 C退火,
以及2分在72 1 C的扩展; 并且一次最后的扩展走
在72 1 C. 10分
PCR 产品(12 ml)消化而没有更进一步
有限制endonucleases Cfo I,Hae的洗净
III 并且Hinf我(罗奇,曼海姆,德国)根据
供应者' s 指示。 最终其它人两endonuclease
使用,Dde我把区分开
种类Hanseniaspora guilliermondii 和Hanseniaspora
uvarum和Hpa II使物种S. cerevisiae有差异
以及S. paradoxus.

230. 分子鉴定酵母菌yeastcolonies被分派到种程度的扩增及限制性rRNA基因的地区 (风调雨顺-zarzosoetal. 1999年). 用于PCR的引物ITS1(50c