那个大哥大姐帮我翻译下

来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/05/18 09:11:09
2.3. Molecular identification of yeasts
Yeast colonies were assigned to the species level by
amplification and restriction of rRNA gene region
(Esteve-Zarzoso et al., 1999). For PCR the primers
ITS1 (50-CCGTAGGTGAACCTGCGG-30) and ITS4
(50-TCCTCCGCTTATTGATATGC-30) were used to
amplify two variable regions on the 5.8S rDNA gene
(White et al., 1990).
Cells were collected from agar slant with a sterile
toothpick and resuspended in 70 ml of PCR mixture
containing 50 mM ITS1, 50 mM ITS4, 0.25mM dNTPs
(Bioline Ltd, London, UK), 1X NH4
+, 2.5mM MgCl2 and
1.2U Taq polimerasa BiotaqTM (Bioline Ltd, London,
UK). The rRNA gene region was amplified in a thermocycler
Gene Amps PCR System 9700 (Perkin–Elmer,
Wellesley, MA, USA) under the following conditions:
initial denaturing at 94 1C for 5 min; 35 cycles of the
denaturing at 94 1C for 1 min, annealing at 55 1C for 1 min,
and extension at 72 1C for 2 min;

2.3.酵母的分子鉴定
酵母殖民地被分配到物种水平通过
rRNA基因地区的扩大和限制
(Esteve-Zarzoso et al.，1999)。 入门PCR
ITS1(50－CCGTAGGTGAACCTGCGG-30)和ITS4
(50－TCCTCCGCTTATTGATATGC-30)习惯于
在5.8种S rDNA基因上放大两个易变的地区
(白色的et al.，1990)。
细胞收集从那里琼脂倾斜有一不结果
在PCR 混合物的70 ml的牙签和resuspended
包含50里ITS1，50里ITS4，0.25里dNTPs
(Bioline英国，伦敦，有限公司)，1X NH4
+，2.5里MgCl2 和
1.2U Taq polimerasa BiotaqTM(Bioline有限公司，伦敦，
英国)。 rRNA基因地区被在thermocycler里放大
基因安培PCR 9700系统(珀金-埃尔默，
在下列条件下韦尔斯利，MA，美国)：
5分的在94 1 C 最初变性； 35 循环
1分在94 1 C变性1分，在55 1 C退火，
以及2分在72 1 C的扩展； 并且一次最后的扩展走
在72 1 C. 10分
PCR 产品(12 ml)消化而没有更进一步
有限制endonucleases Cfo I，Hae的洗净
III 并且Hinf我(罗奇，曼海姆，德国)根据
供应者' s 指示。 最终其它人两endonuclease
使用，Dde我把区分开
种类Hanseniaspora guilliermondii 和Hanseniaspora
uvarum和Hpa II使物种S. cerevisiae有差异
以及S. paradoxus.

230. 分子鉴定酵母菌yeastcolonies被分派到种程度的扩增及限制性rRNA基因的地区 (风调雨顺-zarzosoetal. 1999年). 用于PCR的引物ITS1(50c