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来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/03 03:38:00
The localization of PBP3 to cell division sites depends on the presence of FtsW. Strain EC850 contains FtsW if grown in the presence of arabinose. Grown in the presence of glucose for four to five generations, EC850 was depleted of FtsW and showed filamentous growth due to a block in cell division. PBP1B could be cross-linked in vivo to PBP3 and was co-immunoprecipitated withα-PBP3 antiserum independent of the presence or absence of FtsW . This shows that the localization of PBP3 at the division site is not required for its interaction with PBP1B. Cross-linking of PBP1B and PBP3 was also possible in the absence of FtsN in JOE565 cells grown in the presence of glucose for 8–10 generations. In another experiment, MC1061 cells were treated with aztreonam for two generations to
specifically block PBP3 resulting in filamentous growth.Under these conditions more than 70% of the PBP3 molecules were blocked by aztreonam and could not be labelled by biotinylated ampicillin. We have verifie

PBP3的地方化对细胞分裂站点的取决于FtsW出现。 张力EC850包含FtsW,如果增长在树胶醛醣面前。 增长在四个到五个世代的葡萄糖面前, EC850在细胞分裂被耗尽了FtsW并且显示了纤维状成长由于块。 PBP1B能被交互相联体内到PBP3并且是coimmunoprecipitated withα-PBP3出现或缺乏的抗血清独立FtsW。 这表示, PBP3的地方化在分裂站点的没有对于它的与PBP1B的互作用是必需的。 PBP1B和PBP3交联在没有在JOE565在8–10世代的葡萄糖面前增长的细胞的FtsN时也是可能的。 在另一个实验, MC1061细胞对待了与二个世代的aztreonam 造成纤维状成长的specifically块PBP3。在这些条件下超过70% PBP3分子由aztreonam阻拦,并且不能由biotinylated氨苄青霉素标记。 我们核实用于免疫沉淀反应的抗体认可了与一定的aztreonam的PBP3。 活体内交联在细胞执行了增长有或没有免疫沉淀反应withα-PBP3抗血清跟随的aztreonam。 PBP1B在两个样品immunoprecipitates的相似的数额被查出了,表示, PBP3的活动没有对于它的与PBP1B的互作用是必需的。
Using同一个方法我们不可能观察PBP3和amidase AmiC交联。
PBP1B的Cellular地方化

If PBP3和PBP1B之间的功能互作用存在,然后我们会盼望PBP1B在细胞分裂站点地方化。 我们分析了PBP1B的多孔的地方化使用一个单克抗体(mAb) F60-1被指挥反对蛋白质的C终点。 由于使用mAb, PBP1B信号的强度是低,可能由于PBP1B的低复制号码每个细胞和。 PBP1B地方化了在焦点和散开地在收缩站点并且在细胞质膜的圆柱形零件在狂放类型(LM500)细胞,但是不在缺乏PBP1B的ponB突变体SP1026。 用不同的媒介增长的不同的张力细胞或细胞是印象的,并且荧光强度外形(PBP1B和PBP3各自信号)细菌的长度轴被做了。 所有被测量的细胞荧光外形是正常化为信元长度和平均,准许查出在中间细胞信号的一个可能的最大值。的确, PBP1B地方化的信号显示了一个最大值在中间细胞在LM500细胞。

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