我的PCR产物酶切后为什么电泳跑出来什么也没有

来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/05/07 03:12:40
我的PCR产物（反应体系25ul）5ul跑电泳有目的基因，然后用剩余的20ul中10ul和1 0 ×buffer 2 μL , 0. 1% BSA 2 μL , Fok I限制性内切酶( 2U / μL ) 1.25μL , 去离子水补足体积至2 0 μL。3 7 ℃水浴反应1 2 h , 2%的琼脂糖凝胶电泳跑，很浅很浅的两个带，几乎没有，这是怎么回事？请高手指教。 我刚注册似乎没有积分，请不吝赐教

你是把目的基因单切成两个带吗

目的基因多大，切后片段变小了，如果胶太小了可能跑糊了~就当对半切也该用3.0%的来跑

FokI没用过，不知道活性，可能切太久了切糊了，这样你会看到两条带前面（靠近溴酚蓝那方向）会有暗带

同样多的片段不一定一样亮，大片段结合更多的溴酚蓝所以更亮