PCR产物的酶切问题

可以继续。
只需补充加入内切酶便可。
因为你的buffer没有消耗，而BSA本身只是为了保护酶活性的杂蛋白，没有特别功能，量的多少本来关系也不很大。
同行，好运！

结果不确定，第一种可能性是：你PCR反应的温度（退火温度）和时间（延伸时间）没有掌握好。因为PCR反应的特异性决定于退火温度的高低，退火温度越低，应物越容易发生错配，这样的话也会有杂带。第二种可能是酶切不完全，也就是你酶切时间不够，不过你说酶切过夜了，这种可能性不会很大。还有一种可能性，是你酶切时的条件没有掌握好，比如说酶量、离子浓度、酶切所用试剂、水的问题，因为内切酶的作用在这些条件改变的时候是改变的，在条件不适宜时可以表现为一定得星活性，也就是酶在其他非识别位点发生的酶切，这样也会有杂带。还有，问一下你酶切后跑电泳时是公共的电泳槽么，如果是的话，建议你把电泳的缓冲溶液换一下，因为你的合作者在使用电泳槽的时候，可能他的DNA样品污染了电泳槽，这样的话你再跑电泳，就会有杂带。

建议一下.你最好是把PCR产物纯化一下,或者割胶回收时候再进行酶切,酶切得时候干扰越少越好,

再加点酶就好了。
保险起见的话，如果你还有你的PCR产物，再重新做一次酶切好了。同时做另外一个不同的酶切鉴定可以更说明问题所在。